純化水微生物限度檢查是確保水質(zhì)安全的重要步驟，主要目的是確定水中微生物的數(shù)量和種類，以評估其是否符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和要求。下面小編就來介紹下純化水微生物限度檢查采用薄膜過濾法的操作流程。

　　純化水微生物限度檢查所需設(shè)備

　　（1）微生物限度檢測儀和培養(yǎng)箱、凈化工作臺。

　?。?）無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液：取磷酸二氫鉀3.56g、磷酸氫二鈉7.23g、氯化鈉4. 0g、蛋白胨1.0g，加水1000ml，微溫溶解，濾清，分裝，滅菌。

　　純化水微生物限度檢查分析步驟：

　　微生物限度檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級下的局部潔凈度100級的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。檢驗(yàn)全過程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影響供試品中微生物的檢出。細(xì)菌及控制菌培養(yǎng)溫度為30～35℃;霉菌、酵母菌培養(yǎng)溫度為23～28℃。

　　細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)

　　A 供試品檢查——薄膜過濾法

　　采用薄膜過濾法，濾膜孔徑應(yīng)不大于0.45μm，直徑一般為50mm，若采用其他直徑的濾膜，沖洗量應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的調(diào)整。選擇濾膜材質(zhì)時(shí)應(yīng)保證供試品及其溶劑不影響微生物的充分被截留。濾器及濾膜使用前應(yīng)采用適宜的方法滅菌。使用時(shí)，應(yīng)保證濾膜在過濾前后的完整性。水溶性供試液過濾前先將少量的沖洗液過濾以潤濕濾膜。油類供試品，其濾膜和濾器在使用前應(yīng)充分干燥。為發(fā)揮濾膜的最大過濾效率，應(yīng)注意保持供試品溶液及沖洗液覆蓋整個(gè)濾膜表面。供試液經(jīng)薄膜過濾后，若需要用沖洗液沖洗濾膜，每張濾膜每次沖洗量為100ml。總沖洗量不得超過1000ml，以避免濾膜上的微生物受損傷。 取相當(dāng)于每張濾膜含1ml的供試液，加至適量的稀釋劑中，用pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或其他適宜的沖洗液沖洗濾膜，沖洗方法和沖洗量同“計(jì)數(shù)方法的驗(yàn)證”。沖洗后取出濾膜，菌面朝上貼于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)。每種培養(yǎng)基至少制備一張濾膜。

　　B 陰性對照試驗(yàn) 取驗(yàn)用的稀釋液1ml，照上述薄膜過濾法操作，作為陰性對照。陰性對照不得有菌生長。

　　C 培養(yǎng)和計(jì)數(shù)

　　除另有規(guī)定外，細(xì)菌培養(yǎng)3天，霉菌、酵母菌培養(yǎng)5天，逐日觀察菌落生長情況，點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)，必要時(shí)，可適當(dāng)延長培養(yǎng)時(shí)間至7天進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)并報(bào)告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計(jì)數(shù)。點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)后，計(jì)算各稀釋級供試液的平均菌落數(shù)，按菌數(shù)報(bào)告規(guī)則報(bào)告菌數(shù)。若同稀釋級兩個(gè)平板的菌落平均數(shù)不小于15，則兩個(gè)平板的菌落數(shù)不能相差1倍或以上。 一般營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基用于細(xì)菌計(jì)數(shù);玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基用于霉菌及酵母菌計(jì)數(shù);酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基用于酵母菌計(jì)數(shù)。在特殊情況下，若營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上長有霉菌和酵母菌、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基上長有細(xì)菌，則應(yīng)分別點(diǎn)計(jì)霉菌和酵母菌、細(xì)菌菌落數(shù)。然后將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上的霉菌和酵母菌數(shù)或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基上的細(xì)菌數(shù)，與玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基中的霉菌和酵母菌數(shù)或營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中的細(xì)菌數(shù)進(jìn)行比較，以菌落數(shù)高的培養(yǎng)基中的菌數(shù)為計(jì)數(shù)結(jié)果。 細(xì)菌、霉菌和酵母菌總數(shù)每1ml不得過100個(gè)。

需要注意的是，在微生物檢測過程中，一些因素可能會影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。例如，缺氧、污染源、物種種類等因素都可能影響樣品的真實(shí)性。因此，在檢測過程中要嚴(yán)格控制這些因素，確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

總之，純化水微生物限度檢測是確保水質(zhì)安全的重要措施。通過遵循嚴(yán)格的檢測標(biāo)準(zhǔn)和操作程序，可以有效地保證純化水的質(zhì)量，從而保障其在各個(gè)領(lǐng)域的安全使用。