中國藥典2015年版規(guī)定純化水微生物限度檢查：取本品不少于 1ml。美國藥典(USP)歐洲藥典(EP)中都是取10ml混合均勻的水樣。還有人說過濾100ml更適合反映真實的情況。

　　過濾的越多越能體現(xiàn)真實的微生物限度水平，這是基本的共識。但是便于之后的計數(shù)是我們不得不考慮的內(nèi)容。一般來說在每個平板上形成30~300個菌落屬于有效計數(shù)范圍。如果過濾體積過大，濾膜上的菌落超過300cfu就會有邊界模糊的現(xiàn)象造成無法準確計數(shù)。有些公司的微孔濾膜上會帶有方格，一般為180-200個左右，就是為了方便計數(shù)。

　　那我們到底要過濾多少體積呢?最好結合本公司的純化水的微生物限度值歷史數(shù)據(jù)水平盡量多過。極端的說，如果你公司純化水歷史數(shù)據(jù)都是0，那可以取多少純化水過濾多少。如果從純化水的微生物限度標準(1ml需氧菌總數(shù)不得過100cfu)來說，過濾3ml比較合適，只要在合格范圍以內(nèi)，每膜不超過300cfu方便計數(shù)。折中的情況，過濾10ml是比較多的選擇，但是如果你公司的純化水歷史數(shù)據(jù)維持在30cfu/ml以上，過濾10ml的話膜上會長出300cfu以上的菌落，就太多了不好計數(shù)了。

　　如果取10ml,兩片膜共長1000個菌以下并不定是不合格的。因為取水10ml,只能每次取5ml, .各用于兩片膜的過濾，每張膜只能培養(yǎng)出細菌或霉菌，不能同時 出細菌和霉菌，所以結果計算時體積只能算5ml, 按5ml計，兩片膜有1000 個，則每1ml有200個了所以應判為不合格，.只有在500個以下才能算合格的。

　　應該說05年版藥典的標準比00年更為合理，因為采用薄膜過濾法，取樣量可以加大(平板法時取1ml),更態(tài)培養(yǎng)微生物，對于檢驗更有代表性。二般不可能平板計數(shù)法不合格，而采用過濾法確熊合格，取樣曩加太卮境養(yǎng)出微生物的機率更大e若相反要竟一下愿因:是不是檢測有問題。

　　采用薄膜過濾法可以通過驗證來確定取樣量，也并不一 定取5-10ml,若純化水中含微生物量較少，則取樣量可加大，但不能培養(yǎng)出太多菌落導致無法點計，影響計數(shù)結果。若含微生物較多，則取用量可減少，總之，在不影響計數(shù)的前提下，盡可能加大取樣量。另采用薄膜過濾法可以不必加無菌水稀釋，直接濾過即可。

　　再多說一句，為了取樣有代表性，國外藥典中要求的混合均勻是好的操作。